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Pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求

pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求

  pcr實(shí)驗(yàn)是指微量DNA顯著增加的基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法。pcr實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用于艾滋病檢測(cè)、乙型肝炎、禽流行病、癌基因檢測(cè)診斷、DNA指紋、個(gè)人識(shí)別、親子鑒定、法醫(yī)物證等生物學(xué)領(lǐng)域。今天,中國(guó)測(cè)試實(shí)驗(yàn)室詳細(xì)解釋了PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)、施工要求和要點(diǎn)。

一、pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)布局。

  pcr實(shí)驗(yàn)室原則上是四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū),包括試劑準(zhǔn)備區(qū)。樣品準(zhǔn)備區(qū)。擴(kuò)建區(qū)和擴(kuò)建產(chǎn)品分析區(qū),并設(shè)有專用走廊。每個(gè)工作區(qū)應(yīng)設(shè)置緩沖室,連鎖裝置應(yīng)安裝在工作區(qū)和緩沖區(qū)。不同功能的工作區(qū)域應(yīng)獨(dú)立,每個(gè)工作區(qū)域都有明顯的標(biāo)志,不能直接通過。如果連接緊密,應(yīng)安裝貨物傳輸窗口。前兩區(qū)為擴(kuò)建前區(qū),后兩區(qū)為擴(kuò)建后區(qū),即試劑準(zhǔn)備區(qū)-樣品準(zhǔn)備區(qū)-PCR擴(kuò)建室-產(chǎn)品分析室,不得反向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室氣流也應(yīng)從擴(kuò)建前區(qū)域流向擴(kuò)建后區(qū)域,不得反向流動(dòng)。紫外線燈應(yīng)安裝在每個(gè)工作區(qū)域的頂部,波長(zhǎng)254mm,每20㎡40W。

二、實(shí)驗(yàn)室各區(qū)的功能及主要設(shè)備。

1.試劑準(zhǔn)備區(qū):主要制備試劑。包裝和主反應(yīng)混合物。樣品生產(chǎn)中使用的試劑盒材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域。試劑原料必須儲(chǔ)存在該區(qū)域,并在該區(qū)域準(zhǔn)備所需的試劑。該區(qū)域的主要設(shè)備包括平衡、冰箱、離心機(jī)、樣品加樣器、振蕩器等。對(duì)氣流壓力控制沒有嚴(yán)格要求,一般為+10Pa。

2.樣品制備區(qū):主要用于樣品保存、核酸提取、膨脹反應(yīng)管和DNA測(cè)量中的儲(chǔ)存和添加合成。該區(qū)域的主要設(shè)備包括冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、取樣器、振蕩器等。該區(qū)域的壓力梯度要求為:與相鄰區(qū)域相比,為避免氣溶膠污染,一般為+10Pa。

3.擴(kuò)展區(qū):DNA擴(kuò)展主要進(jìn)行。此外,DNA模板(樣品制備區(qū))的添加和主反應(yīng)混合物(試劑制備區(qū))的制備也可在該區(qū)域進(jìn)行。該區(qū)域的主要設(shè)備展示器。冰箱。離心機(jī)。取樣器等。該區(qū)域的壓力梯度要求為:與相鄰區(qū)域的負(fù)壓相比,以避免該區(qū)域的氣溶性泄漏。

4.擴(kuò)展產(chǎn)品分析區(qū):測(cè)量擴(kuò)展產(chǎn)品。該區(qū)域的主要設(shè)備包括酶標(biāo)記儀、洗衣機(jī)、取樣器和水浴箱。該區(qū)域的壓力梯度要求為:與相鄰區(qū)域相比,一般為-25Pa,以避免產(chǎn)品從該區(qū)域擴(kuò)散到其他區(qū)域。